原创《蕨菜组织培养技术现状与趋势》：本文是一篇关于蕨菜论文范文，可作为相关选题参考,和写作参考文献。
摘 要：从目前蕨菜组织培养技术现状出发,阐述了外植体、培养基成分、消毒方式及外源添加物对培养效果的影响,并对蕨类组织培养存在的问题、发展趋势及前景进行分析和讨论.
关键词：蕨菜；组织培养；影响因素；发展趋势
中图分类号：S647 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2017）16-0030-04
蕨菜是医食两用的林下野生蔬菜,具有极高的经济价值和保健功能.基于需求量和持续性发展的要求,其繁殖方式越来越受到研究者及生产者的关注.目前,蕨菜人工驯化繁殖方式主要有3种：根茎繁殖、孢子繁殖和组织培养繁殖.根茎繁殖虽然简单易操作,成株率和成活率较高,但费工费时且对野生资源破坏严重；孢子繁殖虽应用广泛,但从孢子萌发到孢子体形成和生长,期间所需环境条件极其严苛,而孢子萌发所需温、湿度与真菌孢子萌发的条件相似,导致孢子繁殖成苗率低；组织培养是近年来备受重视的一种快速繁殖方法,它具有取材少、成苗量大、不受季节限制、速度快等优点.
目前,蕨菜组织培养所用外植体材料可分为配子体和孢子体2类,配子体包括孢子和原叶体；孢子体包含根状茎、叶柄、幼叶等.从适宜的外植体、培养基种类、成分、激素的种类及用量、有机物的添加及培养条件等方面对蕨类组织培养进行了研究.
1 蕨菜组织培养技术
1.1 以孢子为外植体的组培技术
一般以MS和1/2 MS为基本培养基,附加2%蔗糖、0.5%琼脂,pH值5.8～6.0,根据需要加入植物生长调节剂.然后将培养基在120℃高压灭菌锅中灭菌30 min备用.
将采集到的成熟孢子用无菌滤纸包好,曲别针固定封口,将纸包置于70%的酒精溶液中消毒30 s,无菌蒸馏水清洗2次,再用0.1% HgCl2消毒150 s,无菌水清洗4～5次.然后用滴管吸取孢子溶液,滴于准备好的培养基中.培养室温度控制在25℃左右,光强2 500～3 000 lx,每天保证16 h光照.
郭宇兰等[1]认为,在孢子组织培养的过程中,孢子萌发与无机盐浓度有关,过高过低都不利于孢子萌发及原叶体形成,适宜的培养基为MS和1/2 MS；最适宜的增殖培养基为：1/2 MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L；最适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.05 mg/L+IBA 0.2 mg/L.生根率达98.6%.
1.2 以原叶体为外植体的组培技术
1/2 MS为基本培养基,pH值5.8,在压力1.0～1.2 kg/cm2,经20～25 min 高压灭菌待用.
取成形的原叶体,用清水漂洗干净,0.1% HgCl2消毒5～8 min,再用酒精消毒30 s,最后用无菌水冲洗3～5次,接种到准备好的培养基上.培养温度20～28℃,光照时间3～10 h,光照强度1 500～2 000 lx,培养时间1～2个月.最适宜的原叶体增殖培养基为：1/2 MS +6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L；草炭+松针土是适合原叶体生根的最佳基质[2].
1.3 以叶柄为外植体的组培技术
1/2 MS为基本培养基,添加蔗糖30 g/L,琼脂
8 g/L,高温高压灭菌后备用.取幼嫩蕨菜叶柄冲洗净浮土,再用洗洁精溶液浸泡10 min,之后用软毛刷多次刷洗,用自来水冲洗至无泡沫,再用75%酒精消毒20 s,后用0.1% HgCl2消毒5 min,最后用无菌水冲洗4～5次,无菌滤纸吸干表面水分后接种到准备好的培养基上.培养温度为25℃,光照强度
2 000 lx,光照时间为每天13 h.方利娟等[3]、姜长阳等[4]研究证明,蕨菜叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基是1/2 MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA；愈伤组织增殖最佳培养基是1/2 MS +0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L 6-BA,增殖倍数为8.07；不定苗的生根诱导最佳培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA[3].
1.4 以根状茎为外植体的组培技术
采集根状茎幼嫩先端0.5～1.0 cm,先用75%酒精浸30 s,无菌水冲洗3次,转入1.0% HgCl2中消毒5 min,再用无菌水冲冼3～5次,无菌纸吸干表面水分.基本培养基为1/2 MS培养基附加1.0～1.5 g/L活性炭[5].
适合诱导分化的培养基为1/2 MS+1.5 g/L活性炭+KT 2.0 mg/L+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L.
适合继代培养的培养基为1/2 MS+1.5 g/L活性炭+KT 2.0 mg/L+NAA 0.2～0.5 mg/L.
适合壮苗培养的培养基为1/2 MS+1.5 g/L活性炭+6-BA 0.5～1.0 mg/L+NAA 0.1～1.0 mg/L+GA3 0.2～0.5 mg/L+水解乳蛋白0.1%.
适合生根诱导的培养基为1/2 MS+1.5 g/L活性炭+NAA 0.5 mg/L[6].
目前,在以上几种蕨菜组织培养中,以孢子和根状茎为外植体的组培技术应用比较广泛,且容易成功获得组培苗.
2 影响蕨菜组织培养效果的因素
2.1 外植体和基本培养基的选择
以孢子体为外植体,重要的是对外植体材料质量的选择和审定.外植体材料生理和营养的不同可能会导致组织培养工作的混乱.经过在30 余种培养基类型上的实践证明,蕨菜不同类型的外植体中,以地下茎（根状茎）最幼嫩的包括生長点在内的先端一小段,经过诱导才具有产生大量不定芽的能力[6],也最易诱导形成愈伤组织.选择配子体材料进行组织培养时,如果能获得孢子,大多采用孢子作为外植体.
蕨菜论文参考资料：
结论：蕨菜组织培养技术现状与趋势为关于本文可作为相关专业蕨菜论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文蕨菜论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。
