《水中铜绿假单胞菌盲样考核方法和步骤》:这篇铜绿论文范文为免费优秀学术论文范文,可用于相关写作参考。
【摘 要】 国家食品药品监督管理局为考核检验机构的检验能力,组织了铜绿假单胞菌的盲样考核.本文记录了检验铜绿假单胞菌的方法和步骤.
【关键词】 铜绿假单胞菌 盲样考核 方法
【DOI编码】 10.3969/j.issn.1674-4977.2017.07.007
1 基本特性
铜绿假单胞菌属于非发酵革兰阴性杆菌、假单胞菌属,因其在感染伤口时形成绿色脓液,在琼脂培养基形成蓝绿色绿脓素,故又名绿脓杆菌.该菌分布广泛,常存在于正常人肠道、皮肤及呼吸道中,属条件致病菌,免疫功能低下的人群可致病,如长期服用免疫抑制剂患者、肿瘤放、化疗患者、长期使用激素的患者及艾滋病患者等.
1.1 生物学性状(形态和染色)
革兰阴性专性需氧杆菌,菌体大小(0.5~1.0)[μm]×(1.5~3.0)[μm],呈稍弯杆状或线状,多见成对或短链状排列,单侧有1~3根鞭毛.动力阳性,且运动活跃.
1.2 培养特性
铜绿假单胞菌最适宜生长温度为35℃,普通培养基上形成光滑湿润的菌落.血琼脂平板上形成湿润、蓝绿色有金属光泽、大而扁平的菌落.在麦康凯琼脂平板上,可形成典型型、大肠菌样型、粗糙型、黏液型、侏儒型五种菌落.
铜绿假单胞菌可产色素,如蓝绿色绿腺素、绿色荧光素或红褐色脓红素.
1.3 生化特性
铜绿假单胞菌氧化酶试验阳性,但发酵糖类能力低下,氧化葡萄糖获取能量,不分解乳糖、麦芽糖、甘露糖和蔗糖.枸橼酸盐、硝酸盐还原和精氨酸双水解酶试验均阳性,赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶试验阴性.
1.4 鉴别要点
(1)培养后形成蓝绿色或荧光色菌落,培养基多见亮绿色染色,血琼脂平板产生透明溶血环;菌落有生姜味;动力和氧化酶试验阳性.
(2)不产色素的铜绿假单胞菌(占4%~10%)的鉴定.氧化酶和精氨酸双水解酶试验阳性,葡萄糖O/F试验为氧化型;鞭毛染色呈极端鞭毛(少于3根),动力阳性.
(3)铜绿假单胞菌42[℃]时生长,可区别不能在42[℃]生长的荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌.
(4)氧化酶及七葉苷水解阳性、蓝绿色色素可以用于和浅黄假单胞菌、栖稻假单胞菌区别.
2 致病性
铜绿假单胞菌的主要致病物质是内毒素,除此之外还包括荚膜、菌毛、外毒素、酶及本身结构成分均可致病.
铜绿假单胞菌是正常菌群,免疫力底下时发生感染,是医院内感染的重要病原菌,据统计10%的医源性感染是由铜绿假单胞菌引起的,而烧伤、肿瘤及介入诊断治疗的患者感染率更高达30%.感染源主要是污染的医用器具及带菌的医护人员.铜绿假单胞菌在患病人的病灶中,通常和其他毒力较强的细菌共存,但有时也可单独致病.
铜绿假单胞菌感染部位以受损皮肤黏膜为主,如烧伤、创伤后的皮肤.该菌可引起局部化脓性感染或全身性的感染,引起如尿道炎、下呼吸道感染、中耳炎、角膜炎、胃肠炎、脑膜炎、心内膜炎、骨髓炎等等.铜绿假单胞菌感染率在重症监护室位于病菌感染率的第2位.艾滋病患者适应性免疫功能严重缺陷,因此很容易感染该菌而致病.
3 铜绿假单胞菌盲样考核的步骤
2016年10月中旬接到国家食品药品监督管理局组织的水中铜绿假单胞菌盲样考核样品.
3.1 样品接收
样品正常:10个西林瓶和10个水样品保存完整,编号清晰.编号分别为2958,2975,2978,2982,2991,2993,2963,2971,2980,2983.确认签收后按照GB/T 8538-2008《饮用天然矿泉水检验方法》中的4.54部分开始样品的检测.
3.2 检验步骤
3.2.1 样品的前处理
在生物安全柜内将包装饮用水中铜绿假单胞菌样品的瓶子打开,将相同编号的西林瓶内的菌球倒入瓶内(取出干燥球),充分混匀后使用滤膜过滤.将过滤水样后的滤膜以无菌操作移放在CN琼脂培养基上,依此法,分别对10件样品进行混合处理.
3.2.2 培养
将平板置于36℃培养48h,并防止干燥.
3.2.3 结果观察
CN琼脂上的菌落有两种形态,将非蓝/绿菌落,在365nm紫外线(使用暗箱式紫外灯)下进行观查.记录观察结果.
3.2.4 确证性试验
将需做确证性试验的产荧光(非蓝/绿)菌落划线接种营养琼脂培养基,36℃培养24h.再将纯培养物和阳性对照菌株接种到商品化乙酰胺肉汤生化试剂管中,36℃培养24h.
确认试验结果:疑似菌落均为阴性.
3.3 结果报告
2958,2975,2978,2982,2991,2993检出铜绿假单胞菌,2963,2971,2980,2983未检出铜绿假单胞菌.
作者简介
高元,研究生,中级职称,现任锦州市产品质量监督检验所微生物室主任.
刘畅,本科,中级职称,现任锦州市产品质量监督检验所中心检验部副部长.
柏杨杨,本科,现任锦州市产品质量监督检验所微生物室检验员.
铜绿论文参考资料:
结论:水中铜绿假单胞菌盲样考核方法和步骤为适合铜绿论文写作的大学硕士及相关本科毕业论文,相关如何清除铜绿开题报告范文和学术职称论文参考文献下载。