原创《利用穴盘育苗筛选抗根肿病大白菜材料的实用技术》：本文关于肿病论文范文,可以做为相关论文参考文献,与写作提纲思路参考。
导 读：大白菜根肿病在全国乃至世界范围内的发生日趋严重,严重影响着大白菜的品质和产量.通过不断试验,探讨出一套利用穴盘育苗筛选大白菜抗根肿病材料的实用技术,以期为大白菜根肿病抗性品种的快速、有效选育提供依据.
目前国内对十字花科根肿病的研究集中在其致病机理及病害防控上,对选育抗病品种这一最为经济有效的防病方法的技术研究却不多.利用基质和穴盘育苗筛选抗根肿病材料对关键环节的技术要求较高,通过2013-2015年3年的试验积累,探讨出一套利用穴盘育苗筛选大白菜抗根肿病材料的实用技术,再结合田间抗性鉴定、单株留种,希望为大白菜根肿病抗性品种的快速、有效选育做出贡献.
1 新鲜根肿组织中休眠孢子的分离提纯
接种用休眠孢子最好从新鲜根肿组织中提取,可保证孢子的致病力.为避免其他杂菌、杂物对试验结果的影响,需对休眠孢子进行分离、提纯.根肿组织流水冲洗干净后晾干,-20℃冰箱中冷冻备用.将10 g根肿组织切碎,加50 mL 灭菌水,在研钵中研细或用榨汁机打碎,然后用4层脱脂纱布过滤,将滤液移入一干净的50 mL离心管,3 100 r/min离心15 min,弃上清液,沉淀重溶于50 mL灭菌水,
3 100 r/min离心10 min,此步操作重复2次.弃上清液,在沉淀中加5 mL 50%蔗糖溶液,混匀后,3 100 r/min离心10 min,用移液把上清液小心移入1支干净的离心管,加30 mL灭菌水,3 100 r/min离心10 min,弃上清液,沉淀重溶于30 mL灭菌水,3 100 r/min离心10 min,此步操作重复2次,最后沉淀溶于5 mL灭菌水,-20℃冰箱中冷冻备用.
2 育苗接种专用试验棚的准备
有条件的地区,可利用单独的日光温室或于发病地头建塑料大拱棚,专做抗根肿病材料苗期接种、筛选试验用,同时注意防止休眠孢子的扩散.或做长×宽×高为150 cm×30 cm×120 cm的可移动铝合金棚架,两宽面置外拉门,四面均用60目防虫网罩起.棚架上部设单脊双面屋顶,用塑料膜覆盖防雨.竹条苗床裁成合适大小置于棚底.将网棚置于易于隔离、通风见光良好的地块,内挂2块黄板,处于网棚中上部位置.网棚周围铺0.5 m石灰条带防止孢子扩散.当外界温度高于25℃时,棚顶要覆遮光率50%的遮阳网遮光.
3 带菌基质配制及材料播种
3.1 带菌基质配制
大白菜一般用50穴穴盘育苗,旧穴盘要用50%百菌清可湿性粉剂1 000倍液喷洒消毒、冲洗晾干后方可使用.秋季育苗基质配方为草炭∶蛭石∶珍珠岩等于3∶1∶1,春季育苗基质配方为草炭∶蛭石∶珍珠岩等于6∶1∶3.装盘时,将菌液稀释后均匀拌入基质,按根肿组织∶基质等于1∶20的质量比掺匀.
3.2 播种
华北地区一般春季在2月底3月初,秋季在8月下旬,将试验材料播种于穴盘中,每穴1～2粒,要保证种子的纯度和净度在99%以上.蛭石和珍珠岩（体积比1∶1）覆盖后,將苗盘移到育苗接种专用试验棚苗床上,浇透水,春季覆膜保墒秋季不用.保证棚内夜温16～23℃、昼温20～26℃,温度过低时加盖保温材料,过高时通风及覆遮阳网遮荫.
4 播种后管理及伤根处理
4.1 播种后苗盘管理
播种后5天左右大白菜即可出苗,要及时揭膜,防止烤苗.子叶展平前及时间苗、移补苗.出苗后视基质含水量,一般每2～3天微喷1次清水,浇水量不宜过大,防止稀释基质中孢子浓度,保持基质湿度60%～70%即可.幼苗第3片真叶展开时,结合浇水,每3～5天喷施1次瑞莱20-10-20通用型肥料1 000倍液.气温高时,浇水次数增加至每天1次,但注意控制喷水量,保持基质湿度70%～80%即可.如网棚中不慎进入害虫,可用1.8%阿维菌素乳油2 000～3 000倍液防治菜青虫、夜蛾等,用10%吡虫啉可湿性粉剂3 000倍液防治蚜虫.
4.2 伤根处理
为提高接种的成功率,出苗后15～20天,在早晨或傍晚进行1次伤根处理.操作时,距白菜幼苗根茎部0.5～1.0 cm,用小刀垂直于穴孔基质表面插下至穴孔底部,注意不要伤及幼苗主根、割破穴盘,一刀即可.伤根后及时浇水.
5 统计调查
一般出苗后45天左右,感病对照品种全部发病时开始统计调查.由于穴盘育苗的大白菜根系紧紧缠绕基质,不易将根系完全洗出,为保持抗病材料根系的完整性以便定植,采用直接观察根坨法统计：0级,主根、侧根无肿块；*,侧根有明显肿块,主根无肿块；2级,主根有明显肿块,侧根无肿块；3级,主、侧根均有少量明显肿块；4级,主、侧根均有大量严重肿块.材料抗病性评估标准：高抗,0<病情指数<10；抗病,10≤病情指数<20；耐病,20≤病情指数<30；感病,30≤病情指数≤100.病情指数=
[∑（各级发病株数×各病级代表数值）/（调查总数×最高病级代表数值）]×100.调查后的根肿组织可洗净晾干后,冻于-20℃冰箱中留待下次接种用.
6 抗病单株的田间鉴定、留种
对于初选出的高抗或抗病单株材料,春季若通过春化处理（种子催芽后,0～3℃冰箱中20天低温处理再播种穴盘）,可直接定植于根肿病选种专用试验田进行小株采种,同时进行田间抗病性鉴定、筛选；秋季则先定植于根肿病选种专用试验田,11月下旬经田间抗病性鉴定后,选取母株入窖假植,来年春天再定植进行成株采种.
7 穴盘育苗接种法与其他抗性检测方法的比较分析
2013年9月,针对16份大白菜自交系材料对根肿病4号优势生理小种的抗性（接种用病样采自青岛农业科学院试验田）,田间种植抗病性鉴定和穴盘育苗接种抗性检测的同时,委托青岛农业大学园艺学院对材料进行抗病主效基因CRa和CRb的PCR检测,结果表明,穴盘育苗接种法与田间抗病性鉴定的结果最相近,比抗病基因PCR检测法的准确率高出11.8%（表1）.
与菌土法、蘸根法、浸芽法、注射法等人工接种鉴定方法相比较,穴盘育苗接种直接用草炭配制的基质试验,pH值6.0左右,满足根肿病发病条件,操作简便；筛选出的抗病单株材料由于是穴盘育苗,定植于根肿病选种试验田后缓苗快,成活率高；穴盘育苗微环境的一致性和后继的田间抗病性鉴定,提高了抗病材料筛选的准确率；穴盘育苗便于集约化操作,可同时筛选大量材料,加快了抗病品种选育进程.
肿病论文参考资料：
结论：利用穴盘育苗筛选抗根肿病大白菜材料的实用技术为关于对写作肿病论文范文与课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文肿病论文开题报告范文和相关文献综述及职称论文参考文献资料下载有帮助。
